在蛋白和抗体纯化工作中，如何准确的进行定量一直是一个棘手的问题。传统的方如Bradford，BCA等操作繁琐，耗时长，而通过测定蛋白质的紫外吸收来定量，则非常快速方便。
蛋白质拥有的紫外吸收性质是来自芳香族氨基酸如色氨酸、酪氨酸分子内含有共轭双键，在280纳米波长附近具有最大的光吸收峰。由于大多数蛋白质均含有酪氨酸、色氨酸残基，所以测定蛋白质在280纳米波长处的吸光度，是分析溶液中蛋白质含量的一种最快速简便的方法。
其优点是快速，对样品无破坏，缺点在于此法是根据酪氨酸（Tyr），苯丙氨酸（Phe），色氨酸（Trp）残基的强吸收值来测定的，不同的蛋白质其含量不同，所以当蛋白中缺乏这几种氨基酸时，定量就不准了，就得考虑其他方法。另外核酸，和其他所有含有苯环共轭π键的物质（如蛋白洗脱用的咪唑）都会影响其定量，在测定前应先透析除去。
一、如何利用微量分光光度计来测定蛋白浓度
01 首先打开软件，选择Protein A280。
02 再在右上角选择样品的类型，1Abs=1mg/ml为测定未知蛋白的选项（如果是测试抗体浓度，可以选择igG预设参数，大部分厂家的设备都含有这个参数）。
03 然后用纯水将比色皿清洗三次，选择合适的溶液作为背景，滴入2µl，按blank减去背景。再用纯水将比色皿清洗三次，滴入2µl样品，按measure测定。下方就会显示样品的A280值即为浓度。
04 到这一步还没完！
还需要到https://web.expasy.org/protparam/，上输入蛋白的序列来查找消光系数，用测得的A280除以该蛋白的消光系数，才是最终的准确浓度。
菲恩生物严格把控每一个生产的蛋白或抗体产品的质量，质控方面使用传统的SDS-Page胶染色,对比标准品浓度的BSA蛋白，确定浓度和纯度，同时参考全进口微量分光光度计以获得最准确的数据，让产品在纯度和浓度上不会出现偏差。
二、举例菲恩生产蛋白验证的过程的结果图(DOG43为蛋白编号)
01 12%SDS-PAGE验证（其中BSA标准品为1mg，上样10ul）
02 DOG43蛋白序列进行分析，计算消光系数。
03 微量分光光度计浓度测定结果。
菲恩生物蛋白表达平台现已为国内外用户提供了近3000种重组蛋白产品，涵盖人类及常见种属的炎症因子、信号通路、诊断原料、受体蛋白、酶、抗原等领域。菲恩生物专业提供蛋白标记、偶联等特色服务，可满足用户各种实验需求。