产品

本公司产品仅供体外研究使用,不用于临床诊断

AP(Allopregnanolone) ELISA Kit

四氢孕酮(AP)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争ELISA检测法,实验时长2小时。试剂盒中提供的微孔板已预先包被AP。样品或标准品中的待测AP会与预先包被于酶标板的AP,竞争结合固定量的生物素标记的抗AP的抗体。游离的成分被洗去。加入HRP-链霉亲和素(SABC),生物素与链霉亲和素特异性结合,形成免疫复合物。洗去未结合的偶联物,加入TMB显色底物,TMB 在辣根过氧化物酶(HRP)的催化下呈现蓝色,加反应终止液后变成黄色。用酶标仪在 450 nm 波长测 OD 值。使用曲线方程软件,将样品的OD450值与标准曲线进行比对,确定样品中AP的浓度。目的物质的浓度与OD450值之间呈反比。

别称:Allopregnanolone ELISA Kit
货号:EU0198反应性:Universal
检测范围:1.563-100ng/ml灵敏度:0.938ng/ml
¥2480
规格:
货期: 三个工作日+顺丰快递时长
  • 产品介绍
  • 相关文献
产品名称
AP(Allopregnanolone) ELISA Kit
别称
Allopregnanolone ELISA Kit
货号
EU0198
规格
48T/96T
种属
Universal
样本类型
血清,血浆,细胞培养上清液,细胞裂解液或组织裂解液,其它生物液体样品
检测方法
Competitive ELISA, Coated with Antigen
检测波长
OD450
反应时间
2小时
检测范围
1.563-100ng/ml
灵敏度
0.938ng/ml
存储条件
2-8°C (未开封时), 切勿冻存
特异性
特异性和 AP 结合,与其它类似物无明显交叉反应
Elisa试剂盒组件
组件 名称 规格(48T) 规格(96T) 开启后保存条件
E001 Elisa酶标板(可拆卸) 8孔×6条 8孔×12条 将未使用的孔放入拉链铝箔袋中,并加入干燥剂,密封保存。可在2-8°C保存1个月;在-20°C保存6个月。
E002 冻干标准品 1支 2支 将未使用的标准品放入干燥剂包中。可在2-8°C保存1个月;在-20°C保存6个月。
E003 浓缩生物素-抗体 100X 1支 30ul 1支60ul 2-8°C (避光)
E034 浓缩HRP-链霉亲和素100X 1支 60ul 1支120ul
E024 TMB显色底物 1瓶 5ml 1瓶 10ml
E039 样品稀释液 1瓶 10ml 1瓶 20ml 2-8°C
E040 抗体稀释液 1瓶 5ml 1瓶 10ml
E049 SABC稀释液 1瓶 5ml 1瓶 10ml
E026 反应终止液 1瓶 5ml 1瓶 10ml
E038 浓缩洗涤液 25X 1瓶 15ml 1瓶 30ml
E006 覆膜 3张 5张  
E007 说明书 1份 1份
试剂盒组件外所需器材和试剂
  1. 酶标仪(波长450nm滤光片)
  2. 37°C恒温箱(不推荐使用细胞用CO2培养箱)
  3. 自动洗板机或多道移液器/5ml滴管(手工洗板用)
  4. 精密的单道(0.5-10μL, 5-50μL, 20-200μL, 200-1000μL)和多通道移液器(移液器使用前需校准)。
  5. 无菌的EP管及一次性吸头
  6. 吸水纸及加样槽
  7. 去离子水或蒸馏水
操作步骤概要
Elisa实验原理图
  • 步骤1: 添加标准品和样品之前,洗板2次。
  • 步骤2: 向相应孔中加入50ul标准品或待测样品,然后立即加入50ul生物素标记的抗体工作液(此步骤吸头触及液面后,不可重复使用),轻轻震荡酶标板1分钟,贴上覆膜,37°C静置孵育45分钟。
  • 洗板: 洗板3次。每次浸泡1分钟。
  • 步骤3: 向每个孔中加入100ul HRP-链霉亲和素(SABC)工作液,贴上覆膜,37°C静置孵育30分钟。
  • 洗板: 洗板5次。每次浸泡1分钟。
  • 步骤4: 添加90ul TMB显色底物。贴上覆膜,37°C避光静置孵育10-20分钟(请使用TMB显色精准控制方法)。
  • 步骤5: 添加50ul反应终止液。立即在450nm处读取OD450值并计算。
标准曲线

本产品经品管部检测,符合使用手册的性能要求。(实验室湿度为20%-60%,温度为18°C -25°C。显色前将TMB平衡至37°C,加酶标板孔后,37°C避光孵育15分钟。)

因具体实验环境及操作存在差异,以下实验数据和标准曲线仅供参考,实验人员需根据自己的实验建立标准曲线。

STD.(ng/ml) OD-1 OD-2 Average
0 2.171 2.235 2.203
1.562 1.665 1.713 1.689
3.125 0.966 0.994 0.98
6.25 0.659 0.679 0.669
12.5 0.464 0.478 0.471
25 0.299 0.307 0.303
50 0.166 0.17 0.168
100 0.102 0.104 0.103
回收率

将一定含量的AP加入样本中,并通过将测量值与样品中AP的预期量进行比较来计算回收率。

样品类型 回收率范围(%) 平均回收率(%)
血清(n=10) 93-103 97
EDTA血浆(n=10) 92-105 98
肝素血浆(n=10) 87-100 93
线性度

将添加有适当浓度AP的样品分别稀释2倍、4倍、8倍来检测,得出回收率范围。

样品类型 1:2 1:4 1:8
血清(n=10) 86-96% 86-96% 86-104%
EDTA血浆(n=10) 85-99% 83-98% 86-99%
肝素血浆(n=10) 88-96% 81-97% 82-94%
精密度(%)

板内精密度:低、中、高浓度样本分别在同1块酶标板上检测20次。

板间精密度:低、中、高浓度样本分别在3块酶标板上检测20次。

类别 板内变异系数 板间变异系数
样本 1 2 3 1 2 3
数量 20 20 20 20 20 20
平均值(ng/ml) 2.91 13.11 49.73 3.24 13.75 51.04
标准差 0.12 0.52 2.33 0.14 0.81 3
变异系数(%) 4.23 3.95 4.69 4.23 5.91 5.88
稳定性

未拆封的试剂盒在37°C和2-8°C进行稳定性实验,得出稳定性数据。

试剂盒(n=5) 37°C一个月 2-8°C六个月
平均值 (%) 80 95-100