TUNEL In Situ Apoptosis Kit (HRP-DAB Method)

FNCK105

TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒（HRP-DAB显色法）

20 Assays / 50 Assays / 100 Assays

-20℃可保存一年。Streptavidin-HRP和DAB Concentrate (20×)需避光保存。

TUNEL原位细胞凋亡检测试剂盒（HRP-DAB显色法）是一种高灵敏度且操作简便的细胞凋亡检测方法。本试剂盒适用于组织样本(石蜡切片、冰冻切片)和细胞样本(细胞涂片、细胞爬片)的原位凋亡检测，检测结果可通过普通光学显微镜观察。

细胞在发生凋亡时，会激活一些特异性的DNA内切酶，这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA，暴露的3’-OH可在末端脱氧核酸转移酶(TdT)的催化下与生物素标记的dUTP连接，辣根过氧化物酶(HRP)标记的Streptavidin (Streptavidin-HRP)可与生物素结合，在HRP的催化下通过DAB显色来观测凋亡细胞，结果可通过普通光学显微镜进行观察。

1. 细胞样本

固定液（4%多聚甲醛溶于PBS）。

阻断剂（3% H2O2溶于去离子水）。

通透液（0.2%的Triton-100溶于PBS）。该溶液建议提前1天配制在4度保存。

2.石蜡切片

二甲苯、无水乙醇。

阻断剂（3% H2O2溶于去离子水）。

3.冰冻切片

固定液（4%多聚甲醛溶于PBS）。

阻断剂（3% H2O2溶于去离子水）。

4.其他试剂

PBS、ddH2O、苏木素、中性树胶。

5.仪器

光学显微镜。

1)1×蛋白酶 K 工作液：取 1 μL Proteinase K (100×) 加入99 μL PBS 中，混匀。现用现配。

2)1×DNase I Buffer 工作液：按照 9:1 的比例用 ddH2O 将DNase I Buffer (10×) 稀释待用。现配现用。

3)DNase I 工作液（200 U/mL）：用 1×DNase I Buffer 工作液，按照 99：1 稀释比将 DNase I (20 U/μL) 稀释待用。现配现用。

注： DNase I 会在剧烈混合下变性，建议不要涡旋DNase I 溶液。

4）1×DAB工作液

按照19:1的比例用DAB Dilution Buffer将DAB Concentrate (20×) 稀释待用。现用现配。

1.洗涤过程应充分洗涤，否则会影响后续实验中酶的活性（如DNase I和TdT酶）。用PBS清洗样本后，请用吸水纸吸干样本周围的液体。

2. 实验过程中请保持样本的湿润，防止干片造成的实验失败。

3. TdT酶避免反复冻融，建议不要涡旋。

4.本说明书中推荐的条件是通用的，用户可根据不同的样本类型和预实验的结果，对样本处理时间、试剂浓度等条件进行优化，选择最合适的实验条件。

5.本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

6. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。