实验指南

ELISA实验结束后标曲怎么绘制,样本浓度怎么核算

标准曲线的绘制方法

ELISA试剂盒中样品浓度计算视频

实验结束后,最重要的工作还是如何把OD值转化为浓度,以达到分析数据的目的。

通常,推荐使用专门的曲线拟合工具绘制ELISA标准曲线curve Exert1.4(点击可以下载)作图软件,轻松解决实验室小白的ELISA标曲问题。

1、启动“Curve Expert1.4”

2X 轴输入所对应的浓度值,Y 轴输入标准品的OD值,如图:

3、单击[运行] 按钮,出现如下对话框:

4、单击[ok]按钮,出现如下两个对话框,关闭下面一个对话框:

5、在对话框的右上角出现一些曲线的名称,从“1”开始依次点击曲线名称,在右下角会出现相应拟合的曲线:

6:根据拟合的曲线选取ELISA拟合度最佳的曲线双击,出现如下对话框:

注意:选择系数(即“r”值)最好的曲线方程来进行运算。在下面的对话框右上角有“r”值 ,当“r”值越接近1 拟合度越好。

7.按[Ctrl]+[L]键或者右键单击选择[analyze],出现如下对话框:

8、输入标准的OD 值,单击[Calculate]按忸,即可得到待测蛋白的实际含量(标本稀释了N倍,运算出的数值应在成以N)。

9、如果出现,可以调节相应的值;即根据预测的X结果,选择附近的数值即可。

注意:标本稀释了N倍,运算出的数值应再乘以N

10、如想得到ELISA拟合曲线的方程,可在步骤6的对话框空白处右击,选择“Information” 得到如下对话框:点击“Copy

11、在你需要的位置粘贴即可得到如下数据:

MMF Model: y=(a*b+c*x^d)/(b+x^d)

Coefficient Data:

a=-6.06664294836E-003

b=5.04094988368E+002

c=2.85669892499E+000

d=9.33313776080E-001