Enhanced Cell Counting Kit 8 (CCK8/WST-8)

FNCK064

细胞

避光保存，2-8℃保存一年有效，-20℃保存2年有效。

增强型CCK8试剂盒,简称WST-8，是一种基于WST-8的快速、高灵敏度,用于细胞活力、增殖和细胞毒性检测的试剂盒。该试剂盒只需0.5-1小时即可完成测试，并且比传统CCK-8试剂盒更快，更敏感，并且具有更宽的线性范围。本试剂盒适用于450nm左右吸光度的测定。

WST-8是一种类似于MTT的化合物，在电子偶联试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶还原，生成橙黄色可溶性的formazan。细胞增殖得越多越快，颜色就越深；细胞毒性越强，颜色越浅。颜色的深度和细胞数目之间存在线性关系。

与WST-1相比，WST-8更检测灵敏度更高，更易溶解，更加稳定。

本试剂盒经过优化，培养时间大大缩短，一般仅需0.5-1小时即可完成检测。

本试剂盒检测非常便捷，只有一管配置好的增强型CCK-8溶液，不需要进一步制备和其他操作。无须使用同位素，所有的检测步骤都在同一个96孔板上进行。

酚红和血清对试剂盒的测定无显著影响。

本品对细胞无明显毒性。加入增强CCK-8溶液后，可在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，方便找到最佳测定时间。

96孔板每100μl细胞需要10μl增强CCK-8溶液，该试剂盒每1ml可进行100次检测。

1. 通常细胞增值实验每孔中加入100微升2000个细胞，细胞毒性实验每孔中加入100微升5000个细胞(每孔使用的细胞数量，需要根据细胞大小、细胞增殖速度等因素决定)，同时设只有细胞培养基的孔作为阴性对照。

2. 根据实验设计对细胞进行培养和处理。

3. 每孔100μl细胞加10μl的CCK8溶液，继续培养1-4h。

4. 在450nm测定吸光度，如无450nm滤光片，可以使用420-480nm滤光片。

1. 试剂盒反复冻融会降低检测效果，虽然该试剂在反复冻融3次后对检测效果无明显影响，但可在第一次解冻后分装成小规格。反复冻融过程中，可能出现少量沉淀，应将其平衡至室温，并尽可能溶解。

2. 多数情况下，在细胞中加入增强型CCK-8溶液孵育0.5-1小时可获得理想结果，但孵育时间因细胞类型、细胞密度等实验条件的不同而不同。

3. 信号强度和稳定性会受到温度的影响。反应前，将细胞和增强型CCK-8溶液平衡至室温。

4. 由于使用96孔板进行检测，如果细胞培养时间较长，一定要注意蒸发问题。一方面，由于96孔板周围一圈最容易蒸发，可以采取弃用周围一圈的办法，改加相同量的PBS、水或培养液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方，以缓解蒸发。

5. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，所以还原剂(例如一些抗氧化剂)会干扰检测，如果待检测体系中存在较多的还原剂，需设法去除。

6. 用酶标仪检测前需确保每个孔内没有气泡，否则会干扰测定。

7. 本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。