同型对照

同型对照

同型对照(Isotype Control)指与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量的免疫球蛋白,用于消除由于抗体非特异性结合而产生的背景信号。

如何选择同型对照

1.使用未标记一抗和标记二抗,那么同型对照需要选择和一抗相同来源,相同亚型的抗体,如果使用直接标记的一抗,那么同型对照还需要和一抗有相同的标记物。采用和一抗实验浓度相同的同型对照,以获得正确的结果分析。

2.如果没有找到适合的同型对照,在保持来源相同、荧光标记相同、免疫球蛋白类别相同条件下,那么优先选择的顺序应该是亚链不同--亚型不同--相同类别。

比如,某种的抗体的来源是Mouse IgG2а,κ。如果在同型对照表里面找到不到完全相同的同型对照,那么优先选择相同荧光标记Mouse IgG2а为同型对照。如果也没有找到Mouse IgG2а,那么优先选择相同荧光标记的Mouse IgG2b作为同型对照。如果最后还是没有找到Mouse IgG2b,那么选者相同荧光标记的Mouse IgG2作为同型对照

同型对照应用

1.流式细胞实验

染色方式为:样本管:一抗+样本,同型对照管:同型对照+样本在以下情况中,实验人员必须使用同型对照确保流式实验的准确性:

1.1、实验人员流式经验较少;

1.2、进行胞内蛋白流式实验,针对细胞内靶标的抗体即使不与抗原结合,也常常会出现被拦在细胞内;

1.3、实验不常见或特异性不高的抗体。

2.免疫组化和免疫荧光实验

当同型对照的显色信号弱于特异性抗体,才能说明是抗体和样本中的目标蛋白结合。

3.IP(免疫沉淀实验)

下图的control IgG为同型对照,同型对照样本只能检测到抗体的重链条带,没有目的蛋白条带

4.Elisa实验检测某种特异抗体时,可用同型对照排除非特异结合

货号

产品名称

宿主

规格

目录价

FNSA-0106

Normal Rabbit IgG Control

Rabbit

1ml

¥1,800

FNSA-0109

Normal Human IgG Control

human

1ml

¥2,280

FNSA-0130

Normal mouse IgG Control

Mouse

1ml

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FNSA-0131

Chicken IgY-Isotype Control

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1mg

¥2,280

FNSA-0133

Goat IgG-Isotype Control

Goat

10mg

¥6,720

FNSA-0134

Rat IgG-Isotype Control

Rat

10mg

¥6,720