同型对照(Isotype Control)指与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量的免疫球蛋白,用于消除由于抗体非特异性结合而产生的背景信号。
同型对照
如何选择同型对照
1.使用未标记一抗和标记二抗,那么同型对照需要选择和一抗相同来源,相同亚型的抗体,如果使用直接标记的一抗,那么同型对照还需要和一抗有相同的标记物。采用和一抗实验浓度相同的同型对照,以获得正确的结果分析。
2.如果没有找到适合的同型对照,在保持来源相同、荧光标记相同、免疫球蛋白类别相同条件下,那么优先选择的顺序应该是亚链不同--亚型不同--相同类别。
比如,某种的抗体的来源是Mouse IgG2а,κ。如果在同型对照表里面找到不到完全相同的同型对照,那么优先选择相同荧光标记Mouse IgG2а为同型对照。如果也没有找到Mouse IgG2а,那么优先选择相同荧光标记的Mouse IgG2b作为同型对照。如果最后还是没有找到Mouse IgG2b,那么选者相同荧光标记的Mouse IgG2作为同型对照
同型对照应用
1.流式细胞实验
染色方式为:样本管:一抗+样本,同型对照管:同型对照+样本在以下情况中,实验人员必须使用同型对照确保流式实验的准确性:
1.1、实验人员流式经验较少;
1.2、进行胞内蛋白流式实验,针对细胞内靶标的抗体即使不与抗原结合,也常常会出现被拦在细胞内;
1.3、实验不常见或特异性不高的抗体。
货号 |
产品名称 |
宿主 |
标记物 |
规格 |
FITC-30073 |
Rat |
FITC |
20T/100T |
|
PE-30073 |
Rat |
PE |
20T/100T |
|
APC-30073 |
Rat |
APC |
20T/100T |
|
FITC-30075 |
Rat |
FITC |
20T/100T |
|
PE-30075 |
Rat |
PE |
20T/100T |
|
APC-30075 |
Rat |
APC |
20T/100T |
|
FITC-30076 |
Mouse |
FITC |
20T/100T |
|
PE-30076 |
Mouse |
PE |
20T/100T |
|
APC-30076 |
Mouse |
APC |
20T/100T |
|
PCP-30076 |
Mouse |
PerCP |
20T/100T |
|
FITC-30077 |
Mouse |
FITC |
20T/100T |
|
PE-30077 |
Mouse |
PE |
20T/100T |
|
APC-30077 |
Mouse |
APC |
20T/100T |
|
FITC-30078 |
Mouse |
FITC |
20T/100T |
|
PE-30078 |
Mouse |
PE |
20T/100T |
|
APC-30078 |
Mouse |
APC |
20T/100T |
2.免疫组化和免疫荧光实验
当同型对照的显色信号弱于特异性抗体,才能说明是抗体和样本中的目标蛋白结合。
3.IP(免疫沉淀实验)
下图的control IgG为同型对照,同型对照样本只能检测到抗体的重链条带,没有目的蛋白条带
4.Elisa实验检测某种特异抗体时,可用同型对照排除非特异结合
货号 |
产品名称 |
宿主 |
规格 |
目录价 |
FNSA-0106 |
Rabbit |
1ml |
¥1,800 |
|
FNSA-0109 |
human |
1ml |
¥2,280 |
|
FNSA-0130 |
Mouse |
1ml |
¥2,280 |
|
FNSA-0131 |
Chicken |
1mg |
¥2,280 |
|
FNSA-0133 |
Goat |
10mg |
¥6,720 |
|
FNSA-0134 |
Rat |
10mg |
¥6,720 |
引用文献
Nature Communications IF: 17.6940
Single-cell transcriptome and translatome dual-omics reveals potential mechanisms of human oocyte maturation- 货号
- 产品名称
- FNSA-0106
- Normal Rabbit IgG Control
Advanced Science IF: 15.1000
Multi‐Omics Analysis Reveals Translational Landscapes and Regulations in Mouse and Human Oocyte Aging- 货号
- 产品名称
- FNSA-0106
- Normal Rabbit IgG Control