内参抗体

内参抗体

内参蛋白对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白,它们在各组织和细胞中的表达相对恒定,在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。FineTest提供全套单克隆和多克隆内参抗体,高特异性和多种应用类型,可满足您大多数蛋白定性,定量和定位分析。除了常见的人,小鼠,大鼠,我们还提供更多其他种属如兔、斑马鱼、猴子等的内参抗体,以及各种定制包装服务。

抗体验证示例

FNab03342  GAPDH antibody

FNab00880 Beta Tubulin antibody

如何选择合适的内参抗体

①考虑目的蛋白分子量,一般需要与目的蛋白分子量相差5kD以上;

②根据蛋白表达位置选择不同的内参,不同细胞器选择的内参也不同。

样本类型

内参选择

兔多抗

鼠单抗

内参分子量(kDa

全细胞、细胞质

β-actin

FNab00869

FNab00873

42

α-actin

FNab00319

 

GAPDH

FNab03342

FNab03343

36

β-tubulin

FNab00880

FNab09105

50-55

α-tubulin

FNab00333

FNab00335

vinculin((分子量大时选择)

FNab09799

FNab09800

117

细胞核

Lamin B1

FNab04682

FNab04683

66

TBP

FNab10263

FNab08527

38

YY1

FNab10027

 

65-70

Histone H3

FNab03888

 

18

PCNA

FNab06215

FNab06217

38

HDAC1

FNab03792

FNab03793

55

细胞膜

ATP1A1

FNab00691

 

100-110

线粒体

VDAC1

FNab09826

 

31

COXIV

FNab01912

FNab01914

17-20

内质网

calreticulin

FNab01224

 

55-60

高尔基体

GM130

FNab03558

 

130

溶酶体

LAMP2

FNab04686

FNab09834

100-120

血液

Transferrin

FNab08929

FNab08930

77

③考虑组织特异性。以下为各种小鼠组织中常见内参的表达水平,供大家参考。

内参抗体使用方法

一、 标记内参使用法:只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体,按照正常操作即可。

二、普通内参:当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量相差不大时,可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测。然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体,重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。

三、当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下,可以在转膜后预染,根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分,使内参蛋白与目的蛋白分开。然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行