内参蛋白即内部参照蛋白，对于哺乳动物细胞表达来说一般是指由管家基因编码表达的蛋白，它们在各组织和细胞中的表达相对恒定，在检测蛋白的表达水平变化时常用它来做参照物。

所有WB实验都需要内参，用以校正蛋白质定量、上样过程中存在的实验误差，保证实验结果的准确性。此外使用内参可以作为空白对照，检测蛋白转膜情况是否完全、整个Western Blot显色或者发光体系是否正常。

FineTest提供全套单克隆和多克隆的内参抗体组合，高特异性和多种应用类型，可满足您绝大多数的蛋白质定性，定量和定位分析。除了常见的人、小鼠、大鼠，我们还提供更多其它物种的内参抗体,以及各种包装定制服务。

①考虑目的蛋白分子量，一般需要与目的蛋白分子量相差5kD以上；

②根据蛋白表达位置选择不同的内参，不同细胞器选择的内参也不同。

③考虑组织特异性。以下为各种小鼠组织中常见内参的表达水平，供大家参考。

一、 标记内参使用法：只要在二抗孵育时加入HRP标记内参抗体，按照正常操作即可。

二、普通内参：当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量相差不大时，可以先进行目的蛋白的抗体温育显色和检测。然后使用Strip缓冲液洗掉膜上的抗体，重新进行内参蛋白的抗体温育、显色检测。

三、当目的蛋白的分子量大小与选用的内参蛋白分子量大小相差比较明显情况下，可以在转膜后预染，根据蛋白质Marker的大小将膜剪为大分子量和小分子量两部分，使内参蛋白与目的蛋白分开。然后两块膜分别与内参蛋白抗体以及目的蛋白抗体进行。