FineTest® TMB Substrate

E024

FineTest® TMB 显色液

10ml/50ml/100ml/500ml

TMB(3,3′，5,5′-四甲基联苯胺)是辣根过氧化物酶(HRP)的常用底物，适用于酶联免疫吸附测定(ELISA)。当被辣根过氧化物酶或其他过氧化物酶催化时，TMB产生可溶性蓝色产物。蓝色产物通常可以在370nm或620-650nm进行测定。加入酸终止反应，溶液变黄，在450nm处可测吸光度。

FineTest TMB显色液是一种高度敏感的单组分TMB显色溶液。采用最新的TMB显色技术，TMB与其他相关试剂在单一溶液中制备，使用方便，稳定性好。显色终止后，读数稳定，本底低，批间差异小。试剂一般为无色，有时为微蓝色或浅黄色。

形态:液体。

保存条件:储存在2-8℃，避光储存，有效期2年。

pH: 3.3-4.0。

主要成分:0.01% 3,3'，5,5'-四甲基联苯胺，99%水，0.1%过氧化氢。

1、将整瓶TMB放入37℃恒温箱中平衡30min。

2、HRP偶联物孵育后，取下覆膜，然后用洗涤缓冲液洗板5次。

3、每孔加入90ul TMB显色液，封板，在 37°C 避光静置孵育 10-20 分钟。打开酶标仪预热 15min。(注意：不可使用配制 HRP 偶联物的加样槽。显色根据颜色的实际变化，反应时间可以缩短或延长，但不能超过30分钟。当标准孔中出现较好的蓝色梯度时，可以终止反应。显色强度不易太弱或过强。)

4、底物反应可使用等体积的1 N 盐酸、0.6 N硫酸或其中一种终止液(E026)终止。显色后，孔内液体不可弃掉，向每孔加入 50ul 反应终止液。颜色将由蓝色立即变为黄色。添加终止 液的顺序与添加 TMB 底物的顺序相同。

5、OD值测量:立即用酶标仪450nm读取OD值并计算。

1、如需降低显色强度，建议缩短显色时间或在免疫测定中进一步稀释HRP偶联物或HRP偶联抗体。不建议自行稀释TMB显色液，如有需要，请与我们联系。

2、TMB显色液应避光存放于2-8℃，避免暴露于光、热、金属离子或过氧化物酶。

3、如果发现TMB显色液出现混浊或颜色变成较深的蓝色，应该停止使用。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。