Urea Content Assay Kit

FNK063

尿素含量检测试剂盒

100T

Universal

用于定量检测人体、动物的唾液、乳汁、血浆、血清、尿液等样本中的尿素含量，尿液需要经过处理后再检测。

3个月

仅供科研使用

尿素在脲酶的作用下产生铵离子，铵离子在强碱性介质中能够与次氯酸盐和苯酚反应， 生成水溶性有色产物，产物在 580nm 处具有特征吸收峰，通过吸光值变化即可定量检测尿素的含量。

1.可见分光光度计/酶标仪（580 nm）

2.微量玻璃比色皿（光径 10 mm） /96孔板

3.精密的单道和多道移液器以及干净的一次性枪头

4.干净的EP管

5.蒸馏水、沸石

6.台式离心机

7.恒温水浴/培养箱

尿液：尿液样品最好处理后测定，方法如下：取0.6ml尿液样品，加入 沸石0.3g，加入无氨蒸馏水至15ml，反复震荡数次，吸附尿液中的游离铵盐， 静置后，吸取稀释尿液，所测结果乘以25，如果尿液比较少，可以等比例减少 各试剂的使用量。如果取1ml尿液样品，应加入沸石0.5g，加入无氨蒸馏水至 25ml，反复震荡数次，吸附尿液中的游离铵盐，静置后，吸取稀释尿液，所测 结果乘以25。

血清（浆）：直接进行检测。

1. 配制标准品工作液：取适量的尿素标准(100 mmol/L)，按尿素标准(100 mmol/L)：ddH2O=1:19的比例混合，使尿素浓度达到5 mmol/L，即为标准品工作液-尿素标准(5 mmol/L)；4℃保存，1周有效。

2. 配制脲酶工作液：取适量的脲酶溶液，按脲酶溶液：脲酶稀释液=1:99的比例混合，即为脲酶工作液，现配现用。

3. 空白孔：取1 μL ddH2O加到酶标板孔中，

测定孔：取1 μL待测样本加到酶标板孔中，

标准孔：取1 μL的尿素标准(5 mmol/L)加到酶标板孔中。

4. 向3步骤中空白孔，测定孔，标准孔中加20 μL脲酶工作液，充分混匀，37℃反应15 min。

5. 向4步骤中各孔中加入100 μL试剂四、100 μL试剂五，充分混匀，37℃反应20 min。

6. 酶标仪580 nm，测定OD值。

尿素(mmol/L)=（ΔA测定孔/ΔA标准孔）x 5 mmol/L x f

注释： ΔA测定孔：测定孔OD值-空白孔OD值

ΔA标准孔：标准孔OD值-空白孔OD值

f：样本加入反应体系前的稀释倍数

1. 如果没有酶标仪，也可用分光光度计测定。

2. 如果样品中待测物浓度过高或过低，请对样本做适当的稀释或浓缩。

3. 若所检样本不在说明书所列样本类型之中，建议先做预实验验证其检测有效性。

4. 避免使用铵盐抗凝剂，否则会使结果偏高。

5. 本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用试剂盒所造成的样本消耗负责，使用前请充分考虑样本可能的使用量，预留充足的样本。