Glucose(Glu) Colorimetric Assay Kit(GOD-POD Method)

货号: 
K085
规格: 
48T(32S)/ 96T(80S)
存储条件: 
2-8°C for 6 months
应用: 
Glycolipid metabolism, Disulfidptosis
规格 价格
48T(32S) RMB ¥200
96T(80S) RMB ¥300
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  • 产品介绍
  • 实验结果
  • 实验条件
货号

K085

规格

48T(32S)/ 96T(80S)

检测仪器

酶标仪(500-510 nm)

适用种属

Universal

应用

用于定量检测全血、血清、血浆、组织样本中的葡萄糖含量。

储存条件

2-8°C避光保存6个月

保质期

见试剂盒标签

仅供科研使用

试剂盒组件

编号

名称

规格1

48T

规格2

96T

储存条件

试剂一

酚溶液(Phenol Solution)

10 mLx1 瓶

20 mLx1 瓶

2-8°C避光保存6个月

试剂二

酶溶液(Enzyme Solution)

10 mLx1 瓶

20 mLx1 瓶

2-8°C避光保存6个月

试剂三

50 mmol/L 葡萄糖标准品(Glucose Standard)

1.2 mLx1 管

1.2 mLx1 管

2-8°C保存6个月

实验原理

葡萄糖氧化酶(GOD)能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸,产生过氧化氢,在色原性氧受体的存在下,过氧化物酶催化过氧化氢,氧化色素源,生成有色物质。

试剂盒组件外所需器材和试剂

1.酶标仪(500-510 nm)

2.96孔板

3.精密的移液器以及干净的一次性枪头

4.干净的EP管

5.生理盐水,双蒸水

6.台式离心机

7.恒温水浴/培养箱

样品处理

血清血浆样本:可直接测定。

全血样本:取新鲜血液加入到盛有抗凝剂(肝素作为抗凝剂,肝素浓度为:10-12.5 IU/mL 血液)的管中,颠倒混匀,取0.1 mL加入0.4 mL双蒸水,充分混匀1 min,静置15 min,制备的5倍溶血液,对光观察澄清透亮待测。

在正式检测前,需选择2-3个预期差异大的样本稀释成不同浓度进行预实 验,可参考 下表进行稀释(仅供参考):

样本

稀释倍数

样本

稀释倍数

人血清

不稀释

人血浆

不稀释

大鼠血清

不稀释

小鼠血清

不稀释

注:稀释液为生理盐水(0.9% NaCl)。

试剂准备

1、检测前,试剂盒中的试剂平衡至室温。

2、酶工作液的配制:

将试剂一:试剂二按1:1的体积比混匀,现用现配,2-8°С避光保存24 h。

3、对照工作液的配制:

将生理盐水:试剂二按1:1的体积比混匀,现用现配,2-8°С避光保存24 h。

4、不同浓度标准品的稀释

编号

1

2

3

4

5

6

7

8

配制的标准品浓度(mmol/L)

0

2

5

10

15

20

25

30

50 mmol/L 标准品(μL)

0

4

10

20

30

40

50

60

双蒸水(μL)

100

96

90

80

70

60

50

40

测定步骤

1、标准孔:取3 μL 8个不同浓度的标准品,分别加入对应的标准孔中;

测定孔:取3 μL待测样本,触底加入样本孔中;

对照孔:取3 μL待测样本,触底加入样本孔中。

2、向步骤1中标准孔和测定孔加入300 μL酶工作液。 向步骤1中对照孔加入300 μL对照工作液。

3、37°С孵育15 min。酶标仪505 nm,测各孔OD值。

注:全血及溶血的血清血浆样本需要设置对照,正常血清血浆不用设置 对照。

操作表

标准孔

测定孔

对照孔

不同浓度Glu标准品(μL)

3

待测样本(μL)

3

3

酶工作液(μL)

300

300

对照工作液(μL)

300

37°С孵育15 min,酶标仪505 nm,测各孔OD值。

结果计算

标准品拟合曲线:y=ax+b

正常血清(浆)样本,Glu浓度计算公式: Glu 含量(mmol/L)= (ΔA505 - b) ÷ a × f

全血及溶血样本,设置对照时Glu浓度计算公式: Glu 含量(mmol/L)= (ΔA’ - b) ÷ a × f

注释: y:标准测定OD值-空白OD值; x:标准品的浓度; a:标曲的斜率;b:标曲的截距 ;

ΔA505:样本测定OD值-空白OD值 ;ΔA’: 样本测定OD值-样本对照OD值; f:样本加入检测体系前的稀释倍数

注意事项

1、 试剂盒仅供研究使用。实验前请仔细阅读说明书并调整好仪器,严格按照说明书进行实验。 实验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。

2、 试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围。如果样品中待测物浓度过高或过低,请对样本做适当的稀释或浓缩。若所检样本不在说明书所列样本类型之中,建议先做预实验验证其检测有效性。

3、最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及实验环境等因 素密切相关。本公司只对试剂盒本身负责,不对由于使用试剂盒所造成的样本消耗负责,使用前请充分考虑样本可能的使用量,预留充足的样本。

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