Total Cholesterol(TC) Colorimetric Assay Kit(COD-PAP Method)

K086

总胆固醇（TC）比色法测试盒（COD-PAP法）

48T(44S)/ 96T(92S)

酶标仪(495-525 nm)

Universal

用于定量检测检测血清（浆）、组织的总胆固醇含量。

2-8°C 避光保存6个月

见试剂盒标签

仅供科研使用

说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。

对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。

总胆固醇(Total Cholesterol，TC)包括游离胆固醇和胆固醇酯。胆固醇酯可被胆固醇酯酶（cholesterol esterase，CE）水解成胆固醇和游离脂肪酸，胆固醇在胆固醇氧化酶（cholesterol oxidase，CO）的氧化作用下生成△4-胆甾烯酮和过氧化氢。过氧化氢在 4-氨基安替吡啉和色原底物存在时，经过氧化物酶 （peroxidase，POD）催化，反应生成有色化合物，其颜色深浅与TC含量成正比。

1.酶标仪(495-525 nm)

2.96孔板

3.精密的移液器以及干净的一次性枪头

4.干净的EP管

5.无水乙醇，生理盐水，双蒸水

6.台式离心机

7.恒温水浴/培养箱

样本要求：样本中不能添加还原性物质，如抗坏血酸、谷胱甘肽等。

血清血浆等液体样本：可直接测定。

组织样本：按照组织质量（g）：无水乙醇体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL无水乙醇）进行冰浴匀浆。10000g，4℃离心 10min，取上清置冰上待测。

在正式检测前，需选择2-3个预期差异大的样本稀释成不同浓度进行预实 验，根据预实验的结果，结合本试剂盒的线性范围：0.2-25.85 mmol/L，可参考下表进行稀释(仅供参考)：

注：血清（浆）稀释液为生理盐水(0.9% NaCl)； 组织样本的稀释液为无水乙醇。

检测前，试剂盒中的试剂平衡至室温。

1、标准孔：取2.5 μL标准品，触底加入标准孔中；

样本孔：取2.5 μL待测样本，触底加入样本孔中；

空白孔：取2.5 μL双蒸水，触底加入空白孔中。

2、向步骤1中各孔加入250 μL酶工作液。

3、37°С孵育15 min。酶标仪510 nm，测各孔OD值。

注释：

ΔA1：样本OD值-空白OD值

ΔA2： 标准OD值-空白OD值

f：样本加入检测体系前的稀释倍数

c：标准品浓度（5.17 mmol/L）

m：组织样本质量 (g)

V：组织样本匀浆液体积（mL）

标准曲线(数据仅供参考)

1、 试剂盒仅供研究使用。实验前请仔细阅读说明书并调整好仪器，严格按照说明书进行实验。 实验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。

2、 试剂盒检测范围不等同于样本中待测物的浓度范围。如果样品中待测物浓度过高或过低，请对样本做适当的稀释或浓缩。若所检样本不在说明书所列样本类型之中，建议先做预实验验证其检测有效性。

3、最终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及实验环境等因 素密切相关。本公司只对试剂盒本身负责，不对由于使用试剂盒所造成的样本消耗负责，使用前请充分考虑样本可能的使用量，预留充足的样本。