Giemsa Staining Solution(10X)

K088

姬姆萨染色液(10X)

100mL

自备材料：

1 、载玻片、显微镜

2 、蒸馏水

3 、甲醇

4 、0. 1～0.5%乙酸

室温保存24个月有效。

Giemsa Staining Solution（姬姆萨染色液）是由天青Ⅱ与伊红混合而成。Giemsa 染色原理和结果与瑞氏染色基本相同，姬姆萨染色液对胞浆着色力较强，能较好的显示 胞浆的嗜碱性程度，特别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒，着色清晰，但是对胞核着色偏深 ，核结构显色不佳，故姬姆萨染液常与瑞氏 染液联合使用。

Giemsa Stain 以进口的姬姆萨色素、甲醇为主要原料，含特有衬染剂，经研磨配制而成，能呈现出清晰的细胞染色效果，经常用于组织切 片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生虫等染色。

嗜酸性颗粒为碱性蛋白质，与酸性染料伊红结合，染粉红色，称为嗜酸性物质；细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性，与碱性染料美蓝或天青结合，染紫蓝色，称为嗜 碱性物质；中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合，染淡紫色，称为中性 物质。

该染液由 10×储存液和磷酸盐缓冲液组成，1:9 混合成工作液后使 用；亦可以分开使用，即先用 Giemsa Stain 染色，再经磷酸盐缓冲液处理，亦可以得到满意的染色效果。

一．一步法涂片染色

1. Giemsa 工作液的配制：

按试剂A:试剂B=1:9 混合，即为 Giemsa 工作液，为即用型试剂，不易保存，即用即配。

2.常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定 1～3min。

3.将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加 Giemsa 工作液覆盖涂片， 室温滴染 15～30min。

4.用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。

5.干燥、镜检。

二．两步法涂片染色

1. Giemsa 工作液的配制：

按试剂A:蒸馏水=1:4混合，即为 Giemsa 工作液，为即用型试剂，不易保存，即用即配。

2.常规方法制备血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定 1～3min。

3.将血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加 Giemsa 工作液覆盖涂片， 室温滴染 15～30min。

4.加入等量磷酸盐缓冲液，轻轻晃动载玻片，室温静置5～10min。

5.用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗。

6.干燥、镜检。

三．组织切片染色

1. Giemsa 工作液的配制：

按试剂A:试剂B=1:9混合，即为 Giemsa 工作液，为即用型试剂，不易保存，即用即配。

2.新鲜组织立即置于 Regaud 固定液固定 2 天，期间应更换 1 次固定液。

3.3%重铬酸钾固定 1 天。

4.流水冲洗 16 个小时或过夜。

5.常规脱水、包埋。

6.制备切片厚度约为 5μm ，常规脱蜡至水。

7.蒸馏水清洗 2 次，每次 1min。

8.入含 Giemsa 工作液染缸浸染 18～24h ，蒸馏水稍微清洗。

9.0. 1～0.5%乙酸洗 1～2min ， 自来水稍微冲洗。

10.用无水乙醇迅速脱水 3 次，每次 5～10s。

11.二甲苯或脱蜡透明液透明，中性树脂封固。

1 、血液涂片或骨髓涂片应厚薄均匀，以免影响染色效果。

2 、涂片染色中Giemsa 染色后，请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。

3 、如果染色过深或过浅，应调整染色时间或工作液浓度。

4 、涂片染色和组织切片染色中，pH 值对染色有一定影响，载玻片应清 洁、无酸碱污染，以免影响染色效果。

5 、染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用，否则染色液可能失效。

6 、组织切片染色中，染色后需用大量 0. 1～0.5%乙酸急速冲洗，避免浮面 沉淀物污染切片后难以洗脱。

7 、0.5%乙酸分化常用于 Giemsa 组织切片染色，如有必要亦可用于细胞涂片，但其浓度应适量下调；0.5%乙酸分化切片时，切片呈粉红色即可终止。

8 、Giemsa 组织切片染色中，无水乙醇脱水要迅速，否则切片易褪色。

9 、涂片染色和组织切片染色中，如需急速获得结果，可按储 存液(10×):磷酸盐缓冲液=1:1 配制 Giemsa 工作液，充分混匀，即为快速 Giemsa 染色工作液，将染色液滴加于细胞涂片或组织切片上，加热染色，20～30s 后重 新加染色液，反复 5～10 次，其余步骤同上。

10 、染色液可重复使用，但不能多次重复，若有沉淀物应过滤后使用。

11 、Regaud 固定液: 按 3%重铬酸钾:甲醛=4:1 配制，临用前混匀，1～2 天 后失效。

12、该试剂仅适用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。