2X PCR Master Mix

K089

400T

-20°C保存一年。

2X PCR Master Mix中含有2X Taq DNA Polymerase，2X PCR Buffer，2X dNTP，只需加入适量引物、模板和水即可进行PCR扩增。大大简化了PCR操作，使操作更加快捷，也减少了PCR操作过程中可能导致的污染，使PCR的重复性更好。

该产品可以进行各种常规的PCR扩增，特别适合用于定性和半定量的PCR扩增，以及2kb以下DNA片段的T载体克隆。

本产品稳定性高，经测试，反复冻融15次后对PCR的扩增效果无显著影响。

本试剂盒用于50微升的PCR反应体系，足够做160个样本；用于20微升的PCR反应体系，足够用于400个样本。

一、设置PCR反应体系：

1.融解并混匀PCR反应所需各种溶液。将2X PCR Master Mix置于冰浴上或冰盒内。

2.参考下表在冰浴条件设置PCR反应体系。

注意：对于不同类型的模板在50μl反应体积中推荐用量如下：

哺乳动物基因组DNA：0.1-1μg；大肠杆菌基因组DNA：10-100ng；质粒DNA：0.1-10ng。

3. 用移液器轻轻吹打混匀，室温离心数秒，使液体积聚于管底。

4.按把设置好的PCR反应体系置于PCR仪上，开始PCR反应。

二、PCR反应参数的设置可以参考如下：

STEP1(起始变性): 94℃ 3min

STEP2(变性): 94℃ 30sec

STEP3(退火): 55℃ 30sec

STEP4(延伸): 72℃ 1min

STEP5(循环): Go To STEP2 for 30 cycles

STEP6(最终延伸): 72℃ 10min

STEP7(临时保存): 4℃ forever

1.由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在使用Taq酶时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。

2.Taq DNA polymerase在PCR过程中每循环的出错几率约为2.2×10-5，对于大于1kb的DNA片段的克隆推荐使用出错几率更低的高保真DNA聚合酶。对于普通的PCR或RT-PCR定性检测或定量检测，Taq DNA polymerase是最佳选择。

3.尽管本产品经过15次反复冻融后仍具有和冻融前几乎相同的PCR扩增效果，但仍宜适当避免反复冻融本产品，多次反复冻融可能使产品性能下降。

4.本产品仅限科研人员使用，不能用于临床诊断或治疗，食品或药品，不得存放于普通住宅。

5.为了您的安全和健康，请穿好衣服，戴好一次性手套。