Hi-Fi PCR Master Mix (2X)

K090

高保真PCR Master Mix (2X)

1mL/1ml*5

-20℃保存，至少一年有效。适当避免反复冻融。如需频繁使用，可取适量存放于4℃，至少3天内有效。

Hi-Fi PCR Master Mix (2X)使用了高保真DNA Polymerase，扩增速度可以达到15s/kb，含有2X Hi-Fi DNA Polymerase，2X PCR Buffer(with Mg2+)，2X dNTP，只需加入适量引物、模板和水即可进行高保真PCR扩增。大大简化了PCR操作，使操作更加快捷，也减少了PCR操作过程中可能导致的污染，使PCR的重复性更好。

该产品可以进行各种常规的PCR扩增，特别适合用于高保真和快速的定性和半定量的PCR扩增，以及长片段DNA（长度可超过12kb）的扩增。

扩增速度极快，扩增小于6kb的DNA片段时，延伸1kb只需要15秒。普通的DNA聚合酶延伸1kb通常需要1-2分钟。它的错误发生概率比Taq酶要低52倍，比pfu酶要约低6倍。

本产品稳定性高，经测试，反复冻融15次后对PCR的扩增效果无显著影响。

1mL用于50微升的PCR反应体系，足够做40个样本；用于20微升的PCR反应体系，足够用于100个样本。

一、设置PCR反应体系：

1. 融解并混匀PCR反应所需各种溶液。将Hi-Fi PCR Master Mix (2X)置于冰浴上或冰盒内。

2. 参考下表在冰浴条件设置PCR反应体系。

注意：对于不同类型的模板在50μl反应体积中推荐用量如下：

哺乳动物基因组DNA：0.1-1μg；大肠杆菌基因组DNA：10-100ng；质粒DNA：0.1-10ng。

3.用移液器轻轻吹打混匀，室温离心数秒，使液体积聚于管底。

4.按把设置好的PCR反应体系置于PCR仪上，开始PCR反应。

二、PCR反应参数的设置可以参考如下：

STEP1(起始变性): 92℃ 3min

STEP2(变性): 92℃ 30sec

STEP3(退火): 55℃ 30sec

STEP4(延伸): 68℃ 15-60s/kb

STEP5(循环): Go To STEP2 for 30-35 cycles

STEP6(最终延伸): 68℃ 10min

STEP7(临时保存): 4℃ forever

注：延伸步骤的时间设置需根据PCR产物的长度进行设置，对于本产品扩增小于6kb的DNA片段时，推荐每kb产物的延伸时间为15秒。扩增大于6kb的DNA片段时，推荐每kb产物的延伸时间为1分钟。

1.由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，反应时时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。

2.尽管本产品经过15次反复冻融后仍具有和冻融前几乎相同的PCR扩增效果，但仍宜适当避免反复冻融本产品，多次反复冻融可能使产品性能下降。

3.本产品仅限科研人员使用，不能用于临床诊断或治疗，食品或药品，不得存放于普通住宅。

4.为了您的安全和健康，请穿好衣服，戴好一次性手套。