Annexin V-FITC Reagent

K096

Annexin V-FITC染色液

50T/100T/200T/500T

2-8°C避光条件下保存1年，禁止冷冻保存。

Annexin V-FITC Reagent用于鉴定凋亡细胞。

Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸 (PS) 有高度亲和力。当细胞发生凋亡

时，膜内侧的磷脂酰丝氨酸 (PS)外翻到膜表面，而被荧光染料FITC标记的Annexin V结合，可通过流式细胞仪或荧光显微镜进行检测。

Annexin V搭配PI或7-AAD、DAPI等DNA染色液使用，可区分处于不同凋亡时期的细胞。

1．细胞按照实验方案进行凋亡诱导，300 ×g离心5 min，弃上清，收集细胞，PBS洗涤一次，轻轻重悬细胞并计数。

2．取1~5×10⁵重悬的细胞，300 ×g离心5 min，弃上清。用PBS洗涤细胞一次，离心后弃上清，加入500 μL稀释的1×Annexin V Binding Buffer重悬细胞。

3．细胞悬液中加入5 μL的Annexin V-FITC Reagent和5 μL的细胞核DNA染色液。

4．轻柔涡旋混匀后，室温避光孵育15~20 min。

5．反应完成后立即上机检测。如不能及时检测，请于冰上避光静置并于1小时内完成检测。

1. 本产品仅供科研使用。

2. 检测贴壁细胞时，需收集诱导凋亡后产生的悬浮细胞，并与后续收集的贴壁细胞一起检测。

3. 应尽量避免消化贴壁细胞带来的机械损伤。同时胰酶的消化液中应尽量不含EDTA，因为EDTA会影响Annexin V与磷脂酰丝氨酸的结合。

4. 如果使用含EDTA的胰酶，收集细胞后应充分清洗，确保EDTA被去除干净。

5. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。

6. 荧光物质易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。

7. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。