Mitochondrial Permeability Transition Pore Assay Kit

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货号

K125

中文名称

线粒体通透性转换孔(MPTP)检测试剂盒

规格

100T

试剂盒组件

名称

规格100T)

方式

Assay buffer

100 mL*2

-20℃

Calcein AM(1000x)

100 μL

-20℃, shading light

Cocl2(100x)

1 mL

-20℃

Ionomycin(200x)

500 μL

-20℃, shading light

保存条件

-20℃避光条件下保存12个月。

检测原理

线粒体通透性转换孔检测试剂盒(Mitochondrial Permeability Transition Pore Assay Kit or MPTP Assay Kit)是一种采用膜通透性的荧光探针Calcein AM检测线粒体通透性转换孔开放程度的试剂盒,也常用于研究细胞凋亡、坏死等细胞死亡。本试剂盒比基于线粒体膜电位的方法能更直接地检测到线粒体通透性转换孔开放程度的变化。

其原理是:首先通过被动运输加载 Calcein AM,后者是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂,能够轻易穿透活细胞膜,被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子 Calcein,从而被滞留在细胞内,使胞质包括线粒体发出强绿色荧光。加入 CoCl2 后,来自胞浆的荧光被 CoCl2淬灭,仅留下线粒体内的荧光。作为对照,可将细胞加载 Calcein AM 和 CoCl2的同时,对其用 Ionomycin处理,从而使细胞加载更多的 Ca2+,引起线粒体通透性转换孔的激活从而使线粒体荧光淬灭。

需自备试剂和器材

细胞培养板、可调节式移液枪及枪头、离心机、荧光显微镜或流式细胞仪

注意事项

1. 试剂盒仅供研究使用,如将其用于临床诊断或任何其他用途,我公司将不对因此产生的问题负责,亦不承担任何法律责任。

2. 实验前请仔细阅读说明书并调整好仪器,严格按照说明书进行实验。

3. 实验中请穿着实验服并戴乳胶手套做好防护工作。

4. 荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

5. Calcein AM (1000X)须尽量避免反复冻融。如果多次使用,请注意适当分装。。

6. CoCl2有腐蚀性,对人体有害或有刺激性,对人体有呼吸道、生殖等特定器官毒性,或致畸致癌毒性,操作时请小心,并确保有效防护以避免直接接触人体或吸入体内,并须注意避免腐蚀其它物品。 CoCl2对水生生物有毒或有害,禁止直接排入环境。

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