蛋白定制服务

  • • 不同蛋白表达系统对比:

    表达宿主 E.coli 昆虫细胞 哺乳动物细胞
    分类 原核 真核 真核
    培养密度
    培养时间 短(1-2天) 中(2-4天) 长(5-7天)
    蛋白折叠 有限
    翻译后修饰 糖基化,磷酸化… 糖基化,磷酸化…
    适用蛋白 低分子量蛋白 分泌性,细胞内蛋白 分泌性蛋白
    费用
    表达细胞 BL21(DE3),Rosetta… Sf9,Sf21,High-five HEK293,CHO
  • • 蛋白定制服务流程:

    蛋白定制服务流程

一、原核蛋白表达服务(E.Coli)

大肠杆菌表达系统是目前应用最广泛,也是最经济实惠的蛋白表达系统。E. coli具有遗传背景清晰、细胞增殖快、培养简单,表达水平高、抗污染能力强等特点。

但大肠杆菌蛋白表达系统也存在一些局限,比如容易过表达形成包涵体,产物内毒素水平高,不能用于糖基化、酰胺化等具有翻译后修饰的蛋白表达。

基于这些特点,原核表达系统更适用于小分子量,修饰较少的蛋白的表达。菲恩生物提供从密码子优化,基因合成到重组蛋白表达及纯化的一站式服务以及内毒素去除等附加服务,以满足客户不同的定制需求。

原核蛋白表达服务案例一 原核蛋白表达服务案例二
服务项目 服务内容 时间
基因合成 密码子优化,构建表达载体,测序,制备质粒 1-2周
蛋白表达 可溶性分析,表达条件优化 1周
蛋白纯化 可溶蛋白纯化,包涵体复性,QC验证 1-2周
结果交付 纯化蛋白样品,COA 共3-4周

二、哺乳动物细胞瞬时蛋白表达服务

哺乳乳动物细胞表达系统能够进行复杂的翻译后修饰,如糖基化、磷酸化、乙酰化等,这使得表达的重组蛋白更接近天然蛋白的构象,具有更高的生物活性和稳定性。

瞬时表达系统操作简捷,实验周期短,能在相对较短的周期内获得少量的重组蛋白。

FineTest®的哺乳动物细胞瞬时表达系统以HEK293和CHO细胞为表达宿主,可提供灵活的服务以满足不同的定制需求,包括标签去除、内毒素去除等。我们拥有自研的高效细胞转染技术,和试剂配方,能在较低成本的基础上为客户提供优良的产品及服务。

哺乳动物细胞瞬时蛋白表达服务案例
服务项目 服务内容 时间
基因合成 密码子优化,构建表达载体,测序,制备质粒 1-2周
蛋白表达及纯化 HEK293/CHO细胞瞬时转染,蛋白纯化,QC验证 2-3周
结果交付 纯化蛋白样品,COA 共3-5周

三、昆虫细胞-杆状病毒蛋白表达服务

昆虫细胞-杆状病毒表达系统能够高效表达外源基因,特别是对于较大的基因片段,其表达效率更高。昆虫细胞对重组蛋白翻译后修饰的模式和能力与哺乳动物细胞类似,能获得与天然蛋白相似的生物活性。

菲恩生物在杆状病毒-昆虫细胞蛋白表达方面具有丰富的经验,凭借高滴度的病毒包装技术,特别适用于表达一些病毒类或毒性蛋白。

昆虫细胞-杆状病毒蛋白表达服务案例一 昆虫细胞-杆状病毒蛋白表达服务案例二
服务项目 服务内容 时间
基因合成 密码子优化,构建表达载体,测序,制备质粒 2周
病毒包装及扩增 病毒包装及扩增 2周
蛋白表达及纯化 病毒感染,蛋白纯化,QC验证 2-3周
结果交付 纯化蛋白样品,COA 共6-7周