IgG抗体是研究、诊断和治疗中最常用的抗体,也是正常人血清中最 abundant的一种,分为IgG1、IgG2、IgG3和IgG4四个亚型,占免疫球蛋白总量的70-85%。它的分子量约为150 kDa,作为主要抗体参与二次免疫反应,并在五类免疫球蛋白中具有最长的半衰期(20-24天)。在小鼠免疫学研究中,单克隆抗体(mAb)的IgG亚型是评估其功能和特性的关键参数。小鼠的IgG有不同的亚型:IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c、IgG3,这些亚型在免疫系统中发挥着不同的生物学作用。
一、小鼠IgG亚型特性
IgG1与体液免疫密切相关,能有效中和抗原,主要在应对外来抗原时发挥作用。IgG2a具有强烈的促炎效应,常激活补体参与免疫防御,是感染和抗肿瘤免疫研究的重要对象。IgG2b在免疫调控和炎症平衡中起作用,常用于研究免疫应答的调节机制。IgG2c仅在部分小鼠品系(如C57BL/6)中存在,功能类似IgG2a,在免疫应答中具有重要作用。IgG3具有多价结合能力,但天然分布较低,常用于补体反应相关研究。
二、抗体如何发挥其功能
抗体通过多种机制发挥作用,大多数与免疫系统的其他功能相关。它们不仅能够阻断分子相互作用,还能通过C1q与抗体的结合激活经典补体途径(即补体依赖性细胞毒性,CDC)。此外,抗体通过与Fc受体结合,桥接抗体介导的免疫反应与细胞介导的免疫反应,发挥重要作用。
三、抗体的几种不同作用形式
(Ⅰ)Blocking:它们通过阻断配体与受体的相互作用,发挥作用;
(Ⅱ) CDC:通过激活补体依赖性细胞毒性(CDC),导致细胞溶解;
(Ⅲ)ADCC:与效应细胞的Fc受体(FcR)结合,引发抗体依赖的细胞介导的细胞毒性;
(Ⅳ)促进吞噬:促进吞噬细胞吞噬病原体。
四、鉴定方式
1.酶联免疫吸附试验(ELISA)
ELISA是一种常见的免疫学方法,用于定量检测不同IgG亚型的水平。通过特异性抗体捕获小鼠IgG亚型,并使用二次抗体进行检测。
2.流式细胞术(FCM)
通过标记不同IgG亚型的特异性抗体,结合流式细胞术,可以对不同亚型进行定量和定性分析。
3.免疫沉淀法(IP)
利用抗小鼠IgG亚型的特异性抗体进行免疫沉淀,以分离和鉴定不同亚型。
4.免疫印迹法(WB)
通过SDS-PAGE电泳分离样品中的IgG亚型,然后使用特异性抗体进行Western Blot检测。
5.免疫组化染色(IHC)
在组织切片或细胞中,使用特异性抗体进行染色,通过显微镜观察不同IgG亚型的表达。
五、小鼠IgG产品用途
小鼠IgG产品广泛应用于免疫学研究、诊断和治疗中。它们常用于抗体鉴定、免疫反应分析、疫苗开发以及细胞标记和分选等实验中。作为封闭剂,用于封闭固相材料表面,减少非特异性结合;作为阻断剂,阻止样品中内源性异嗜性抗体与抗原抗体的非特异性结合,提升灵敏度和特异性。此外,它们还可作为IgG对照品用于生化测试,作为蛋白质稳定剂,或作为参考抗原,在药物试验中观察免疫效果。菲恩生物提供高质量的小鼠IgG产品,广泛应用于免疫学研究。助力您的研究更精准、高效。
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