Treg细胞作用机制及流式检测

Treg细胞是调节性T细胞的简称，由日本生物学家坂口志文于1995年首次发现。他发现成年小鼠外周血中存在一种特殊的T细胞亚群，去除后会诱发自身免疫性疾病，而回输则可阻止疾病发生。Treg属于CD4+细胞，主要在胸腺发育，功能是抑制促炎效应，限制过度免疫应答。Treg数量或功能异常会影响免疫系统，数量过低可能导致自身免疫疾病，而数量过高则可能抑制免疫反应。

一、Treg细胞的表型和作用机制

Treg细胞的主要表型为CD4+CD25+FoxP3/CD127，具体组织中可以结合其他标记物进行更精细的分型鉴定。

目前，Treg细胞的主要流式检测指标分类如下：

FoxP3为核内因子，检测时需固定并破膜，其余指标均为表面标记物，无需破膜。CD25和FoxP3/CD127的表达量较低，因此在配色时应选择高亮度荧光素，并进行FMO对照。

Treg细胞通过多种机制抑制免疫反应。首先，分泌IL-10、IL-4和TGF-β等抑制性细胞因子。其次，通过颗粒酶和穿孔素抑制自然杀伤细胞（NK）和CD8+效应T细胞的细胞溶解反应。此外，Treg细胞竞争性消耗IL-2，降低靶细胞对IL-2的反应性，从而抑制T细胞的增殖，并产生胞外酶CD39和CD73，促进腺苷的产生，进一步抑制增殖。最后，Treg通过T细胞受体和其他分子（如CTLA-4和GITR）调节树突状细胞的成熟和功能。

二、Treg在疾病中的作用

Treg细胞在肿瘤微环境中作为免疫靶点，主要通过抑制抗肿瘤免疫反应来促进肿瘤的发生与发展。它们通过表达抑制因子（如CTLA-4及分泌IL-10和TGF-β）来抑制免疫反应，这可能导致肿瘤细胞的免疫逃逸。此外，Treg细胞通过趋化因子向肿瘤微环境浸润，进一步抑制抗肿瘤免疫。在自身免疫性疾病中，Treg细胞数量减少或功能缺陷可导致免疫耐受紊乱，因此调控Treg细胞的含量可能为治疗自身免疫性疾病提供新策略。

三、Treg细胞检测

流式细胞术（FACS）是检测Treg细胞的主要方法之一，其步骤如下：

样本准备：从外周血、淋巴结或其他组织中分离单核细胞，使用酶或机械方法进行细胞分离。

细胞染色：使用荧光标记的抗体对细胞进行染色。常用的标记物包括CD4、CD25、FoxP3和CD127。通常，CD4+CD25+FoxP3+细胞被定义为Treg细胞。

流式细胞仪分析：将染色后的细胞通过流式细胞仪。仪器会逐个分析细胞，检测其荧光强度和散射光，快速获取每个细胞的特征数据。

数据分析：通过软件分析流式细胞仪获取的数据，绘制出细胞群体的分布图（如散点图或直方图），识别并定量Treg细胞的比例。

人的Treg细胞检测如下图：

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