Sheep TNF-α(Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit

绵羊肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法,实验时长4小时。试剂盒中的酶标板已预先包被抗TNF-α的抗体。将标准品、适度稀释的待测样品分别加入相应孔中,孵育后洗去未结合的成分。加入生物素-检测抗体,生物素-检测抗体与已经结合在包被抗体上的TNF-α相结合。洗去未结合的成分后,加入HRP-链霉亲和素(SABC)。再洗去未结合的成分,加入TMB显色底物,TMB 在辣根过氧化物酶(HRP)的催化下呈现蓝色,加反应终止液后变成黄色。用酶标仪在 450 nm 波长测 OD 值。通过绘制标准曲线计算样品中TNF-α的浓度。目的物质的浓度与OD450值之间呈正比。

别称: 
TNFα ELISA Kit, Tumor Necrosis Factor Alpha ELISA Kit, TNF-α ELISA Kit, DIF ELISA Kit, TNF-alpha ELISA Kit, TNFA ELISA Kit, TNFSF2 ELISA Kit
货号: 
ESH0025
反应性: 
Sheep
检测范围: 
15.625-1000pg/ml
灵敏度: 
9.375pg/ml
¥3280
规格:
货期: 三个工作日+顺丰快递时长
  • 产品介绍
  • 相关文献
  • 实验结果
  • 实验条件
产品名称
Sheep TNF-α(Tumor Necrosis Factor Alpha) ELISA Kit
别称
TNFα ELISA Kit, Tumor Necrosis Factor Alpha ELISA Kit, TNF-α ELISA Kit, DIF ELISA Kit, TNF-alpha ELISA Kit, TNFA ELISA Kit, TNFSF2 ELISA Kit
货号
ESH0025
规格
48T/96T
种属
Sheep
UniProt ID
P23383
样本类型
血清,血浆,细胞培养上清液,细胞裂解液或组织裂解液,其它生物液体样品
检测方法
Sandwich ELISA, Double Antibody
检测波长
OD450
反应时间
4小时
检测范围
15.625-1000pg/ml
灵敏度
9.375pg/ml
存储条件
2-8°C (未开封时), 切勿冻存
特异性
特异性和 TNF-α 结合,与其它类似物无明显交叉反应
Elisa试剂盒组件
组件 名称 规格(48T) 规格(96T) 开启后保存条件
E001 Elisa酶标板(可拆卸) 8孔×6条 8孔×12条 将未使用的孔放入拉链铝箔袋中,并加入干燥剂,密封保存。可在2-8°C保存1个月;在-20°C保存6个月。
E002 冻干标准品 1支 2支 将未使用的标准品放入干燥剂包中。可在2-8°C保存1个月;在-20°C保存6个月。
E003 浓缩生物素-抗体  100X 1支 60ul 1支120ul 2-8°C (避光)
E034 浓缩HRP-链霉亲和素100X 1支 60ul 1支120ul
E024 TMB显色底物 1瓶 5ml 1瓶 10ml
E039 样品稀释液 1瓶 10ml 1瓶 20ml 2-8°C
E040 抗体稀释液 1瓶 5ml 1瓶 10ml
E049 SABC稀释液 1瓶 5ml 1瓶 10ml
E026 反应终止液 1瓶 5ml 1瓶 10ml
E038 浓缩洗涤液 25X 1瓶 15ml 1瓶 30ml
E006 覆膜 3张 5张  
E007 说明书 1份 1份
试剂盒组件外所需器材和试剂
  1. 酶标仪(波长450nm滤光片)
  2. 37°C恒温箱(不推荐使用细胞用CO2培养箱)
  3. 自动洗板机或多道移液器/5ml滴管(手工洗板用)
  4. 精密的单道(0.5-10μL, 5-50μL, 20-200μL, 200-1000μL)和多通道移液器(移液器使用前需校准)。
  5. 无菌的EP管及一次性吸头
  6. 吸水纸及加样槽
  7. 去离子水或蒸馏水
操作步骤概要
Elisa实验原理图
  • 步骤1: 向孔中加入100ul标准品或待测样品,贴上覆膜, 37°C静置孵育90分钟。
  • 洗板: 洗板2次。不浸泡。
  • 步骤2: 加入100ul生物素-抗体工作液,贴上覆膜, 37°C静置孵育60分钟。
  • 洗板: 洗板3次。每次浸泡1分钟。
  • 步骤3: 加入100ul HRP-链霉亲和素(SABC)工作液,贴上覆膜, 37°C静置孵育30分钟。
  • 洗板: 洗板5次。每次浸泡1分钟。
  • 步骤4: 添加90ul TMB显色底物。贴上覆膜, 37°C静置孵育10-20分钟(请使用TMB显色精准控制方法)。
  • 步骤5: 添加50ul反应终止液。立即在450nm处读取OD450值并计算。
标准曲线

本产品经品管部检测,符合使用手册的性能要求。(实验室湿度为20%-60%,温度为18°C -25°C。显色前将TMB平衡至37°C,加酶标板孔后,37°C避光孵育15分钟。)

因具体实验环境及操作存在差异,以下实验数据和标准曲线仅供参考,实验人员需根据自己的实验建立标准曲线。

STD.(pg/ml) OD-1 OD-2 Average
0 0.08 0.084 0.082
15.625 0.1 0.104 0.102
31.25 0.123 0.129 0.126
62.5 0.129 0.135 0.132
125 0.221 0.231 0.226
250 0.429 0.447 0.438
500 1.01 1.052 1.031
1000 2.181 2.27 2.225
ESH0025 Standard Curve Image
回收率

将一定含量的TNF-α加入样本中,并通过将测量值与样品中TNF-α的预期量进行比较来计算回收率。

样品类型 回收率范围(%) 平均回收率(%)
血清(n=10) 89-105 97
EDTA血浆(n=10) 89-100 96
肝素血浆(n=10) 88-101 93
线性度

将添加有适当浓度TNF-α的样品分别稀释2倍、4倍、8倍来检测,得出回收率范围。

样品类型 1:2 1:4 1:8
血清(n=10) 85-98% 95-99% 82-95%
EDTA血浆(n=10) 87-102% 87-99% 81-99%
肝素血浆(n=10) 86-102% 89-94% 80-100%
精密度(%)

板内精密度:低、中、高浓度样本分别在同1块酶标板上检测20次。

板间精密度:低、中、高浓度样本分别在3块酶标板上检测20次。

类别 板内变异系数 板间变异系数
样本 1 2 3 1 2 3
数量 20 20 20 20 20 20
平均值(pg/ml) 30.45 119.2 503 31.87 121.9 491
标准差 1.53 7.39 26.26 2.05 5.88 30.44
变异系数(%) 5.02 6.2 5.22 6.43 4.82 6.2
稳定性

未拆封的试剂盒在37°C和2-8°C进行稳定性实验,得出稳定性数据。

试剂盒(n=5) 37°C一个月 2-8°C六个月
平均值 (%) 80 95-100
期刊名:
DigitalCommons@University of Nebraska - Lincoln
作者:
美国内布拉斯加大学林肯分校
发布日期:
2023-12-29
引用产品:
期刊名:
DigitalCommons@University of Nebraska - Lincoln
作者:
美国内布拉斯加大学林肯分校
发布日期:
2023-12-22
引用产品: