如何使用ELISACalc软件批量计算样品浓度
一、在execl中整理检测数据（以下用菲恩生物产品EH0201人IL-6举例）：
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EH0201 |
Human IL-6(Interleukin 6)ELISA Kit |
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标曲 STD |
||||
|
pg/ml |
OD1 |
OD2 |
OD平均值 |
OD均值-blank |
|
300 |
2.458 |
2.535 |
2.4965 |
2.4175 |
|
150 |
1.734 |
1.628 |
1.681 |
1.602 |
|
75 |
1.128 |
1.089 |
1.1085 |
1.0295 |
|
37.5 |
0.645 |
0.613 |
0.629 |
0.55 |
|
18.75 |
0.398 |
0.312 |
0.355 |
0.276 |
|
9.375 |
0.243 |
0.224 |
0.2335 |
0.1545 |
|
4.688 |
0.168 |
0.148 |
0.158 |
0.079 |
|
0 |
0.078 |
0.08 |
0.079 |
0 |
|
LPS刺激巨噬细胞培养上清样品 |
最终结果 |
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样品类型 |
稀释比 |
OD1 |
OD2 |
OD平均值 |
OD均值-blank |
浓度pg/ml |
浓度x稀释因子pg/ml |
|
1ug/ml LPS |
1/2 |
2.3545 |
2.2755 |
2.386 |
2.323 |
|
|
|
0.5ug/ml LPS |
1/2 |
1.523 |
1.5535 |
1.4745 |
1.584 |
|
|
|
0.1ug/ml LPS |
1/2 |
0.632 |
0.622 |
0.627 |
0.548 |
|
|
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阴性对照无LPS |
1/2 |
0.155 |
0.136 |
0.1455 |
0.0665 |
|
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稀释比=1/2 (50ul样品+50ul样品稀释液)稀释因子=2 |
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二、打开ELISACalc.exe
三、复制标曲的浓度数据到和 OD 值数据（OD 均值-blank）到软件中
3.1、单独整理出标曲数据和 OD 值数据：
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标曲 STD |
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|
pg/ml |
OD均值-blank |
|
300 |
2.4175 |
|
150 |
1.602 |
|
75 |
1.0295 |
|
37.5 |
0.55 |
|
18.75 |
0.276 |
|
9.375 |
0.1545 |
|
4.688 |
0.079 |
|
0 |
0 |
3.2、复制标曲数据到软件，按照以下步骤进行
四、选择方程，如果是曲线建议使用 4 参数方程，同时将 X 值改为 pg/ml, Y 值改为OD450
得到以下结果：
五、批量计算样品浓度，选择由 Y 计算X
六、按照以下步骤复制和点击，得到批量计算结果
七、在 execl 表格完成结果计算（乘以稀释因子）：
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LPS刺激巨噬细胞培养上清样品 |
最终结果 |
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样品类型 |
稀释比 |
OD1 |
OD2 |
OD平均值 |
OD均值-blank |
浓度pg/ml |
浓度x稀释因子pg/ml |
|
1ug/ml LPS |
1/2 |
2.3545 |
2.2755 |
2.386 |
2.323 |
278.16668 |
556.333352 |
|
0.5ug/ml LPS |
1/2 |
1.523 |
1.5535 |
1.4745 |
1.584 |
143.6634 |
287.326794 |
|
0.1ug/ml LPS |
1/2 |
0.632 |
0.622 |
0.627 |
0.548 |
36.800075 |
73.60015 |
|
阴性对照无LPS |
1/2 |
0.155 |
0.136 |
0.1455 |
0.0665 |
4.128111 |
8.256222 |
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稀释比=1/2 (50ul样品+50ul样品稀释液)稀释因子=2 |
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